جمع بندی
دستگاه ایمنی تحت تأثیر عوامل مختلفی چون فعالیت بدنی قرار می­گیرد و سلامت فرد از طریق سلامت این دستگاه در کنار دیگر دستگا­ها حاصل می­ شود. تمام پاسخ­های دفاعی بدن علیه مولکول­های بیگانه و نو ظهور در دستگاه ایمنی به وقوع می­پیوندد که در حفظ هموستاز بدن نقش مهمی دارد. عوامل بسیاری بر سیستم ایمنی اثر می­گذارند که یکی از آنها فعالیت ورزشی می­باشد. به طوری که حجم قابل ملاحظه­ای از پژوهشات به بررسی اثرات فعالیت­های ورزشی بر سیستم ایمنی اختصاص یافته است. در این پژوهشات اثرات انواع تمرینات ورزشی، شدت و مدت آن­ها بر پارامتر­های مختلف سیستم ایمنی بررسی شده است. با توجه به مطالب ارائه شدن در قسمت پیشینه پژوهش، در مورد پاسخ اینترفرون گاما، اینترلوکین4، الگوی سایتوکاینی و تعداد لکوسیت­ها به ورزش و فعالیت بدنی، یافته­های یکسانی وجود ندارد. مطالعات متعددی وجود دارد که اثر تمرینات ورزشی را روی سطوح سایتوکاینی Th1و Th2 را در خون (کوهیوت و بویهم، 2001؛ کوهیوت و همکاران ، 2004؛ کوهیوت و سینچینا، 2001)، عضلات اسکلتی (پورکوپچوک و همکاران، 2007) و شش­ها (لاودر و همکاران، 2006) مورد بررسی قرار داد­ه­اند که برخی مطالعات کاهش، برخی عدم تغییر، برخی نیز افزایش را نشان دادند.
به هر حال با وجود پژوهشات زیاد درباره اثرات ورزش بر سیستم ایمنی، توافق کلی وجود ندارد که این خود مربوط به تفاوت در انواع فعالیت­های ورزشی، شدت و مدت متفاوت تمرینات ورزشی، تفاوت­های فردی و تجربه ورزشی افراد و اندازه ­گیری­های متفاوت عوامل سیستم ایمنی می­باشد و این مسئله انجام پژوهشات بیشتری در این زمینه را آشکار می­سازد. پاسخ سایتوکاین­ها به ورزش ظاهراً پیچیده بوده، و به پارامتر­های ورزشی، تمرین قبلی، محل اندازه ­گیری سایتوکاین (بافت، خون، ادرار) و احتمالاً روش اندازه ­گیری بستگی دارد.
فصل سوم:
روش پژوهش
مقدمه
در این فصل ضمن ارائه اطلاعاتی در مورد روش پژوهش، جامعه و نمونه آماري، ابزار و وسايل اندازه­گيري، مراحل مختلف تحقيق و روش­هاي اندازه­گيري متغير­ها توضيح داده شده و روش آماري به كار رفته براي تجزيه و تحليل اطلاعات ذكر شده است.
3-1- روش تحقيق
اين پژوهش، در رديف پژوهش­هاي شبه تجربي قرار مي‌گيرد.
طرح پژوهشی مورد استفاده در این مطالعه، طرح پیش آزمون-پس آزمون با یک گروه و اندازه ­گیری در زمان­های مختلف می­باشد.
3-2- جامعه آماری، روش نمونه گیری و نمونه پژوهش
کلیه ورزشکاران مرد فوتبالیست دانشگاه جهرم جامعه آماری این مطالعه را تشکیل دادند که از میان آنها 11 نفر به صورت داوطلبانه، هدفمند در پژوهش شرکت کردند آزمودنی­ها برای شرکت در پژوهش سابقه بیماري­هاي قلبی- عروقی، فشارخون، دیابت، سیگار کشیدن و یا استفاده از داروي خاصی را نداشتند. از آزمودنی­ها خواسته شد که در طول اجرای پژوهش از هرگونه فعالیت غیر از برنامه تمرینی خودداري نمایند و پس از تشريح هدف و روش اجراي پژوهش (جزئیات آزمایش و نحوه اندازه ­گیری و چگونگی نمونه‌گیری خون و وجود خطرات احتمالی) و همچنین كسب رضایت نامه (آگاهانه) كتبي از آنها‌، آزمودني­ها وارد مطالعه شدند.

(( اینجا فقط تکه ای از متن درج شده است. برای خرید متن کامل فایل پایان نامه با فرمت ورد می توانید به سایت feko.ir مراجعه نمایید و کلمه کلیدی مورد نظرتان را جستجو نمایید. ))

3-3- متغير­هاي تحقيق
3-3-1- متغير­هاي مستقل:

• • فعاليت­بدني با شدت متوسط

• • فعاليت­بدني با شدت زياد

3-3-2- متغير­هاي وابسته:

• • اینترفرون گاما (IFN-γ)

• • اینترلوکین-4 (IL-4)

• • الگوی سایتوکاینی IL-4)/ (IFN-γ

• • تعداد لکوسیت­ها

3-4- ابزار و وسایل اندازه ­گیری
1- ترازوی دیجیتالی (seca) مدل 767 ساخت آلمان برای اندازه ­گیری وزن آزمودنی­ها
2- قد سنج (Seca) مدل 206 ساخت کشور آلمان برای اندازه ­گیری قد آزمودنی­ها
3- دستگاه فشار خون (Reister) ساخت کشور آلمان برای اندازه ­گیری فشار خون آزمودنی­ها
4- ضربان سنج ديجيتال سينه­اي (بلت) ساخت شرکت پلار برای اندازه ­گیری ضربان قلب
5- کیت الایزا ساخت کشور امریکا برای اندازه ­گیری اینترفرون گاما
6- کیت الایزا ساخت کشور امریکا برای اندازه ­گیری اینترلوکین-4
7- ELISA Readerبرای اندازه ­گیری کیت­های اینترفرون گاما و اینترلوکین-4
8- دستگاه Cell Counter XL 22 ساخت شرکت Drew Scientific، امریکا برای اندازه ­گیری لکوسیت
3-5- روش اندازه­گيري متغيرهاي وابسته
3-5-1- شمارش افتراقي سلول­هاي خوني
شمارش افتراقی سلول­های خونی با بهره گرفتن از دستگاه Cell Counter XL22 در آزمایشگاه تشخیص طبی دکتر رازقی در شهر جهرم انجام شد.
شمارش سلول­هاي ايمني:
تعيين تعداد گلبول­هاي سفيد خون محيطي و شمارش افتراقي آنها به طور معمول با بهره گرفتن از شمارشگرهاي الكترونيكي انجام مي‌گيرد. در اين روش حجم مشخصي از خون تام از مجراي باريكي كه در هر زمان تنها يك سلول از آن مي‌گذرد، عبور داده مي‌شود. با شمارش افتراقي گلبول­هاي سفيد، نسبت جمعيت­هاي گلبول­هاي سفيد (مثل نوتروفيل، لنفوسيت، مونوسيت) مشخص مي‌شود. اين كار با بهره گرفتن از يك شمارشگر الكترونيكي و يا از طريق بافت شناسي و با بهره گرفتن از گسترش خون تام بر روي لام ميكروسكپي انجام مي‌شود. در اين روش تعداد مشخصي از سلول­ها كه معمولاً بيش از صد تا دويست عدد مي‌باشند، شمارش شده و نسبت هر دسته از آنها و همچنين تعداد مطلق هر جمعيت سلولي محاسبه مي‌گردد (مکینون^[90]، 1992).
3-5-2- اندازه ­گیری سایتوکاین­ها به روش ELISA
سنجش ایمنی با واکنش­گر پیوندی با آنزیم (ELISA)^[91]
سنجش ایمنی با واکنشگر پیوندی با آنزیم (ELISA) یکی از ساده­ترین و قابل اعتماد­ترین روش­هایی است که ایمونولوژیست­های ورزشی در اختیار دارند. در واقع گسترش روز افزون ELISA های تجاری در دسترس، محرک اصلی برای پژوهش در مورد اثر ورزش بر دستگاه ایمنی است. استفاده از ELISA به پژوهشگران اجازه سنجش دامنه گسترده­ای از مولکول­ها را می­دهد.
روش ELISA بر اساس اصل ساندویچ پایه­ریزی می­ شود. ابتدا یک صفحه 96 چاهکی، با یک آنتی­بادی دستگیر ویژه مولکول مورد نظر پوشانده می­ شود (تمامی صفحات ELISA تجاری دارای چاهک­های منفرد، از پیش با آنتی بادی دستگیر ویژه پوشانده شده است). سپس نمونه مورد نظر، استاندارد­ها و نمونه­های کنترل به چاهک­های منفرد افزوده شده و سپس برای دوره زمانی مشخص انکوبه می­ شود که در این مدت، مولکول مورد نظر با آنتی­بادی دستگیر ویژه تسخیر می­ شود. به دنبال انکوباسیون، صفحه برای پاک کردن مولکول­های پیوند نیافته از چاهک­های صفحه، چندین بار شسته می­شوند. پس از آن آنتی بادی دوم که با یک آنزیم (مانند پراکسیداز) جفت شده است به هر چاهک افزوده می­ شود. آنتی بادی دوم یک اپی توپ ( اپی توپ جایگاهی روی یک مولکول بزرگ است که آنتی بادی­ها علیه آن ساخته شده و به آن متصل خواهد شد) متفاوت روی مولکول مورد نظر را که به وسیله آنتی بادی دستگیر شناسایی شده است تشخیص می­دهد. در دوره دوم انکوباسیون، آنتی بادی دوم جفت شده با آنزیم به مولکول مورد نظر که به آنتی بادی دستگیر متصل شده است می­پیوندد و ساندویچ کامل می­ شود. پس از چندین بار شستشو برای پاک کردن آنتی بادی دوم پیوند نیافته، یک سوبسترای رنگ­زای آنزیمی به هر چاهک افزوده می­ شود. واکنش آنزیم با سوبسترای خود، سوبسترا را به محصول تبدیل می­ کند که موجب تغییر رنگ می­ شود. بنابر­این هر چه حضور آنزیم بیشتر باشد ( یعنی هر چه تعداد مولکول­های مورد نظر پیوندی با آنتی بادی دستگیر بیشتر باشد) پررنگ­تر می­ شود. برای تعیین کمیت مولکول­های مورد نظر در هر چاهک، میزان جذب (که خاموشی یا چگالی نوری نیز نامیده می­ شود) در یک طول موج ویژه روی میکروپلیت ریدر تعیین می­ شود. سپس منحنی استانداردی با بهره گرفتن از مجموعه ­ای از استاندارد­های با غلظت معین رسم شده و غلظت مولکول مورد نظر موجود در هر چاهک از منحنی کالیبراسیون اندازه ­گیری می­ شود.
ELISAابزاری بی­نهایت حساس، ویژه و سازگار است و می ­تواند برای سنجش بسیاری از مولکول­های بیولوژیکی مانند سایتوکاین­ها، هورمون­ها، مولکول­های چسبان، گیرنده­های محلول، پروتئین­های سیگنالیک درون سلولی و mRNA استفاده شود. در پژوهش­های ایمونولوژی ورزشی از ELISA بیشتر در سنجش سایتوکاین­ها استفاده می­ شود (گلیسون^[92]، 2007).
3-6- خونگیري و اندازه گیري پارامترها